01贴壁细胞造就，细胞不贴壁
可能原因：胰蛋白酶消化过度 ；支原体传染 ；造就基pH值过碱（NaHCO3分化） ；细胞老化 ；接种细胞肇始浓度太低或太高。
解决步骤：缩短胰蛋白酶消化功夫或降低胰蛋白酶浓度 ；分离造就物，检测支原体。清洁支架或造就箱。如发现支原体传染，抛弃造就物 ；使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ；启用新的保种细胞 ；调节最佳接种细胞浓度。
02悬浮细胞成簇
可能原因：造就液中含钙,镁离子 ；支原体传染 ；蛋白酶过度消化使得细胞裂解 ；DNA传染。
解决步骤：用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻巧吹吸细胞获得单细胞悬液 ；分离造就物，检测支原体 ；DNasel处置细胞。
03造就细胞成长缓慢
可能原因：由于更换分歧造就液或血清 ；造就液中一些细胞成长必须成分如谷氨酰胺或成长因子耗尽或不足或已被粉碎 ；造就物中有少量细菌或真菌传染 ；试剂保留不当 ；接种细胞肇始浓度太低 ；细胞已老化 ；支原体传染。
解决步骤：比力新造就液与原造就液成分，比力新血清与旧血清支持细胞成长尝试，让细胞逐步适应新造就液 ；换入新鲜配置造就液，或补加谷氨酰胺及成长因子 ；用无抗生素造就液造就，如发现传染，抛弃造就物 ；血清需保留在-10到-20℃。造就液需在2-8℃避光保留。含血清齐全造就液在2-8℃保留，需在1周内用完 ；增长接种细胞肇始浓度 ；换用新的保种细胞 ；分离造就物，检测支原体。清洁支架和造就箱。如发现支原体传染，抛弃造就物。
04造就细胞成长不好
可能原因：
? 细胞自身的状态
细胞传代次数多，细胞老化 ；
细胞的接种量：接种量过低，细胞成长缓慢 ；
细胞传代功夫过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞成长 ；
胰酶消化功夫过长或过短：功夫过长，细胞殒命 ；功夫过短，细胞未齐全分离而成团，细胞殒命 ；
细胞的冻存与复苏：慢冻速溶。
? 传染
支原体传染 ；
霉菌传染。
? 造就基或血清
更换血清或造就基之前未进行验证 ；
选择的造就基是否相宜 ；
造就基配造是否相宜 ；
造就基配造是否正确无误。
? 造就环境
CO2供给是否正常 ；
造就箱或摇床温度节造是否正确。
解决步骤：凭据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决规划
? 把稳细胞的自身状态：如传代次数，接种量等：
? 预防产生传染（用正规，合法，可朔源的血清） ；
? 要用相宜的血清或造就基，最好经过验证 ；
? 把稳尝试室的环境。
05造就细胞殒命
可能原因：造就箱内无CO2 ；造就箱内温度颠簸太大 ；细胞冻存或复苏过程中危险 ；造就液渗入压不正确 ；造就液中有毒代谢产品堆积。
解决步骤：检测造就箱内CO2 ；查抄造就箱内温度 ；取新的保留细胞种 ；检测造就液渗入压 ；换入新鲜造就液。
